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革兰氏染色实验步骤 - 尊龙凯时生物医疗指南

来源:关媛茂 日期:2025-03-17

实验方法原理:本染色法是基础的微生物学染色技术,适用于细菌标本的制备与分析。通过该方法,可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类,这是细菌分类及进一步分析的重要依据。

革兰氏染色实验步骤 - 尊龙凯时生物医疗指南

实验步骤:

一、实验试剂:

1. 结晶紫溶液:

A液:结晶紫2g,95%乙醇20ml。

B液:草酸铵0.8g,蒸馏水80ml。

使用前24小时将A液和B液混合,过滤后储存于试剂瓶中备用。

2. 碘液:

碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。

将碘与碘化钾混合研磨,逐渐加入蒸馏水,直至完全溶解后补足至300ml。

3. 脱色液:使用95%乙醇。

4. 复染液:

A贮存液:沙黄25g,95%乙醇100ml。

B应用液:A液10ml,蒸馏水90ml。

二、菌片制备:

染色的第一步是制作涂片。在制备菌液涂片时,使用接种环取菌液点于载玻片上,或直接将标本涂布于玻片上。对于菌落涂片,先取生理盐水1滴,置于玻片上,并使用接种针轻挑菌落,涂抹于盐水中。此过程中需轻柔操作,以免影响细胞排列或导致细菌鞭毛脱落,进而影响结果的准确性。制备的涂片应自然干燥,并通过火焰固定,固定温度应控制在适宜范围,以避免细胞形态的改变。完成固定后,方可进行染色。

三、染色方法:

1. 涂片经过火焰固定后,加入结晶紫液染色1分钟,随后用清水冲洗去染液。

2. 加入碘液染色1分钟,随后用清水洗净。

3. 加入脱色液,轻轻摇动约30秒,直至不再有紫色脱落,然后用清水洗净。

4. 加入复染液染色30秒,再用清水洗净。

5. 待涂片干燥后进行显微镜观察。

通过以上步骤,您可以有效地分析细菌特性,增强实验数据的准确性。选择尊龙凯时为您的实验室提供高品质的实验材料和支持,让研究更精准、更高效!

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