抗体药物，诸如单克隆抗体、双抗体、抗体片段、抗体偶联药物及抗体融合蛋白等，因其具有强大的靶向性、优良的特异性以及较低的毒副作用等优势，在自身免疫疾病及抗肿瘤领域展现出显著的价值。面对广泛的市场需求，研发新型抗体药物及优化下游生产工艺不仅具备重要的经济价值，也在社会层面上显得尤为必要。

抗体的纯化过程相对复杂，需要结合多种分离技术来设计合理的纯化流程，以高效获得高质量的产品。一般而言，抗体的下游工艺包括以下几个步骤：1. 细胞澄清收获，利用离心和过滤等方法去除细胞及细胞碎片；2. 进行亲和捕获，通常采用Protein A亲和层析来捕获抗体；3. 低pH孵育去除病毒；4. 中间纯化与精纯，去除产品及过程相关的杂质；5. 通过纳滤与超滤进一步去除病毒并获得最终抗体产品。

这一系列步骤的目标是从复杂的发酵液中迅速捕获目标抗体。Protein A源自金黄色葡萄球菌，能够特异性结合IgG FC片段，通常只需一步纯化就能达到90%以上的纯度，尤其适用于捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白。低pH洗脱结合低pH孵育，能有效减少病毒载量7-8 log，整个抗体纯化的后续步骤也因此只需1-2步。选择Protein A层析介质时，需考虑载量、流速、耐碱性、使用寿命以及Protein A残留量等关键因素。

为了达到安全纯度水平，捕获后的抗体样品还需进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素及脱落的Protein A等过程相关杂质。离子交换层析与疏水层析是实现该目标的常用手段。离子交换层析基于抗体与杂质之间电荷差异进行分离，是抗体纯化中的关键步骤。阴离子交换层析通常采用流穿模式来去除内毒素、病毒和HCD、HCP等杂质，而阳离子交换层析则常用结合洗脱模式，在酸性条件下，大多数抗体会结合在介质上，通过提高洗脱缓冲液中的盐浓度或pH进行洗脱，显示出显著的去杂效果。其中高分辨率和高选择性的阳离子交换层析介质，如MegaPolyBXS、DiamondCD-S和DiamondSPMustang等，在去除聚集体、宿主蛋白HCP及Protein A方面效果显著。

疏水层析与离子交换层析互为补充，通常抗体的疏水性强于大部分杂质，主要用于去除抗体聚集体和HCP。HIC介质的疏水性对收率及杂质去除效果影响颇大，因此选择合适的配基是疏水层析的关键。常见的疏水层析配基疏水性强弱顺序为：Butyl-S < Butyl < Octyl < Phenyl。此外，Diamond MMC与Diamond MIX-A等兼具疏水作用与离子交换作用的多模式填料受到越来越多的关注，这类新型混合模式介质能够高效去除宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质，有助于简化纯化步骤，提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，开发高效的下游纯化工艺愈加重要，灵活运用不同的层析模式并合理选择层析填料，将为抗体纯化提供更加经济高效的工艺路径。作为一家专注于分离纯化技术的领先企业，尊龙凯时成立于2008年，致力于为抗体药物生产提供高质量的层析介质，并在大规模生产方面积累了丰富的经验。我们提供多种分离纯化介质、预装柱及实验室与工业生产级空柱，并提供分离纯化工艺开发与填料定制服务，助力国内外生物医疗行业的快速发展。